How Do Ussing Chambers Work? A Step-by-Step Guide
尤斯室如何工作？EasyMount 尤斯室系统分步指南
尤斯室是生理和药理学研究中必不可少的工具，它使科学家能够研究离子转运、屏障功能以及药物在上皮组织中的渗透性。无论您研究的是肠道吸收、囊性纤维化还是药物测试，一套设计精良的尤斯室系统（例如EasyMount 尤斯室系统）都能简化您的实验，提高可重复性并优化结果。
在本文中，我们将详细介绍Ussing 室的工作原理，包括：
✅如何获取肠道组织样本
✅如何为 Ussing 室实验准备细胞培养物
✅ EasyMount 系统的逐步设置程序
✅数据收集和分析
✅正确的清洁和维护
1. 什么是尤斯室？
尤斯室是一种帮助研究人员研究跨上皮组织转运机制的装置。它由两个隔室组成，隔室之间由上皮组织样本或细胞培养单层隔开。这些隔室可以精确测量离子通量、跨上皮电阻 (TEER) 和短路电流 (Isc) ——这些都是评估屏障完整性和主动转运的关键参数。
EasyMount Ussing Chamber System通过提供以下功能增强了这一经典设计：
✔快速且用户友好的组织安装
✔集成温度和气体控制
✔多腔室高通量能力
✔准确且可重复的电生理测量
2. 获取和准备肠组织样本
对于研究营养吸收、药物渗透性或疾病模型的研究人员来说，获取可行的肠道组织样本是关键的第一步。
肠道组织采集的分步过程：
-
动物选择：
- 通常，肠道是从啮齿动物（大鼠/小鼠）、猪或其他模型中采集的。确保获得伦理批准并遵循动物使用的机构指南。
-
组织解剖：
- 安乐死后立即取出小肠。
- 将切除的组织放入冰冷的含氧林格氏溶液中以保持活力。
-
组织准备：
- 沿肠子长度切开。
- 轻轻去除多余的粘液和结缔组织。
- 使用冲压工具或手术刀切割适合 EasyMount 腔室的圆形或矩形部分。
-
将组织安装到 EasyMount 系统中：
- 将组织固定在腔室两半之间，确保密封防漏。
- 将两个隔室都充满含氧生理缓冲液。
- 启动温度和气体调节，维持生理状态。
3. 为 Ussing 室实验准备细胞培养物
如果您使用细胞培养物而不是组织样本，请按照以下步骤操作：
细胞培养准备的逐步过程：
-
小区选择：
- 使用可形成紧密单层的上皮细胞系，例如Caco-2（肠道）、Calu-3（肺）或 MDCK（肾脏）。
-
播种和生长：
- 在半透性插入物（例如，Transwell 板）上培养细胞。
- 让细胞分化 14-21 天，确保适当的极化和紧密连接的形成。
-
转移到 EasyMount 室：
- 小心地将细胞培养插入物放入腔室中。
- 将缓冲溶液添加到顶端和基底外侧隔室中。
- 开始实验程序。
4. 设置 EasyMount Ussing 室系统
EasyMount Ussing Chamber 的设计旨在实现快速高效的设置，使其成为高通量研究的理想选择。
分步设置过程：
-
准备会议厅：
- 确保所有组件清洁且组装正确。
- 打开温度控制和气体流量（生理条件下为 95％ O₂/5％ CO₂）。
-
插入组织或细胞培养物：
- 将组织样本或细胞培养插入物固定在腔室两半之间。
- 检查密封是否正确以防止泄漏。
-
添加缓冲溶液：
- 用含氧林格氏溶液填充顶端和基底外侧隔室。
- 使用内置磁力搅拌器保持恒定搅拌。
-
插入电极：
- 将电压感应和电流通过电极放入室内。
- 校准电极以确保准确的电生理读数。
-
开始数据收集：
- 测量基线 TEER 和短路电流 (I<sub>sc</sub>)以确认组织活力。
- 引入测试化合物、药物或离子来观察传输动态。
5.EasyMount 系统的清洁和维护
适当的清洁对于维护数据完整性和延长系统寿命至关重要。
逐步清洁方案：
-
取出组织或细胞培养插入物：
- 妥善处理用过的纸巾。
- 用去离子水冲洗腔室组件。
-
对腔室进行消毒：
- 浸泡在非腐蚀性消毒剂中（例如70％乙醇或过氧化氢溶液）。
- 避免使用可能损坏电极的刺激性化学品。
-
冲洗电极和管道：
- 用蒸馏水彻底冲洗电极以防止盐分积聚。
- 将电极存放在适当的电极存放溶液中。
-
正确干燥和储存：
- 重新组装之前，让组件完全风干。
- 将系统存放在无尘环境中，以防止污染。
结论
EasyMount尤斯微室系统是一款先进的工具，用于研究上皮细胞运输和屏障功能，操作简便、效率高。无论使用肠组织样本还是培养的上皮单层细胞，EasyMount 系统都能简化设置、确保测量准确，并简化实验后清洁。
通过遵循本指南中概述的步骤，研究人员可以最大限度地提高数据质量、提高可重复性并优化实验效率。
准备好提升您的研究水平了吗？立即探索EasyMount Ussing Chamber 系统如何彻底改变您实验室的上皮细胞转运研究！