System für die Kamera von Ussing: Komplette Anleitung für Ricercatori
Diese praktische Anleitung für das Laboratorium kommt zu Ussings Haus, um den Epitheltransport zu quantifizieren, den Arbeitsfluss durch den Stromkreis (SCC) und TEER zu verbessern und das System von Physiologic Instruments zu überprüfen, um konsistente Daten und Qualität zu gewährleisten öffentlich.
Cos'è una Camera di Ussing?
Eine Ussing-Kamera ist ein Präzisionsinstrument, das den transepithelialen ionischen Transport durch die Vorbereitung von Zellen oder Gewebe ermöglicht, die Spannung blockiert und den Strom (SCC – Kurzschlussstrom) gegen den Widerstand (TEER – Transepithelialer elektrischer Widerstand) registriert.
Dietro la Scienza:
Im SCC-Modus wurde das Gewebe auf 0 mV eingestellt und der Verstärker wurde mit Strom versorgt, um ein transepitheliales natürliches Potenzial zu erzielen. Diese aktuelle Zeit ist für den ionischen Transport geeignet. Die Technik, entwickelt von Hans Ussing und K. Zerahn im Jahr 1951, wurde im Studio der fisiologischen Epithelologie entwickelt, um Messungen direkt am ionischen Fluss durchführen zu können.
Das Ussing-Kamerasystem berücksichtigt den Goldstandard für:
- Misurare il trasporto attivo di ioni attraverso epiteli
- Werten Sie die Integrität der Epithelbarriere auf
- Studieren Sie die Durchlässigkeit und den Transport von landwirtschaftlichen Betrieben
- Caratterizzare risposte cinetiche tempo-dipendenti
Hauptbestandteile des Systems der Kamera von Ussing
Ein vollständiges Kamerasystem von Ussing umfasst vier integrierte Elemente und wurde daher kritisiert, um eidesstattliche Daten zu erhalten:
1. Camere e Slider
Funktion: Behalten Sie das Gewebe oder die eingelegten Mobiltelefone bei, definieren Sie die Öffnung (Bereich Attiva) und die Lautstärke des Beutels.
Considerazioni chiave:
- Die Öffnungsfläche bestimmt die Stromdichte (μA/cm²)
- Die Lautstärke der Grippekamera wurde durch die Reagenzien ersetzt
- Das Material muss chemisch inaktiv sein (z. B. aus Acryl oder PTFE).
System Physiologische Instrumente:
- EasyMount-System: Innovatives Design mit schneller Materialmontage, kompatibel mit Snapwell-, Transwell- und neuen Materialeinsätzen. Verfügbar in Konfigurationen mit 2, 4, 6 und 8 Zimmern.
- P2300 EasyMount-Kammer: Vielseitige Mehrzweckkamera für Mobiltelefone und Tiermaterialien. Nutzbares Volumen: 2,0–8,0 ml.
- P2400 Low-Volume-Kammer: Kamera mit geringem Volumen (1,0–5,0 ml), ideal für Reagenzien und FLUX-Studien. Flächenmasse 0,71 cm².
2. Elettrodi
Funktion: Ag/AgCl bei Spannungs- und Stromdurchgang tauschen, gleichzeitig am Eingang und am Ende des Gewebes positionieren.
Bewährte Verfahren:
- Verwenden Sie Ag/AgCl-Elektroden zur Vorbereitung von Fresken oder zur Beschaffung vorgefertigter Geräte
- Es werden elektrische Spannungen mit einem Offset von < 3 mV verwendet, um das Gerücht zu beseitigen
- Positionieren Sie die Stellen in gleicher Entfernung zur Teigöffnung
- Stellen Sie regelmäßig elektrische Geräte zur Verfügung, wenn die Offset-Anzeige aktiviert ist
PI-Lösungen: Die elektrischen Physiologic Instruments (Modell P2020) bestehen aus Ag/AgCl-Sets, die für die Verwendung mit dem EasyMount-System konzipiert sind, und zwar mit Bleisets (P2024-40) für vertrauenswürdige Kunden.
3. Verstärker / Spannungsklemme
Funktion: Mehrkanalige Steuerung über den SCC/TEER-Modus mit Echtzeit-Datenerfassung.
Caratteristiche essenziali:
- Spannungsklemmenschaltung mit schnellem Risiko (< 1 ms)
- Auflösung von Strom im Submikroampere-Bereich
- Erwerb von mehrkanaligen synchronisierten Daten
- Pulsierender TEER automatisch ohne SCC-Unterbrechung
Amplificatori PI:
- VCC MC8 Multi-Channel: Spannungs-/Strom-Klemmsystem mit Mehrkanal- und OptiGain-Steuerung für präzise TEER- und Strommessungen auf dem Schaltkreis.
- VCC MC6: Modulares Spannungs-/Stromzangensystem mit 8 Einzeleinheiten, Impulsgenerator und Schnittstellencomputer.
- Kompatibilität mit der Acquire & Analyze-Software zur automatischen Erfassung und Analyse von Daten.
4. Perfusions- und Risikomanagementsystem
Funktion: Temperatur, Vergasung und kostenintensive Lösungsversuche während des Experiments überwachen.
Kontrollparameter:
- Temperatur: maximal 37°C ± 0,1°C
- Vergasung: 95 % O₂/5 % CO₂ pro Puffer-Bikarbonat
- Perfusionsgeschwindigkeit: 2-5 ml/min pro Minute
Accessori PI:
- Anodisierte Blöcke aus Aluminium mit Verteilertemperatur
- Luftregelventil (P2060) zur Gaskontrolle
- Kammerkappen und Schlauchsätze (TK-7) je nach Konfiguration komplett
- Gaswaschflaschen (GWB1) für die Gasumidifizierung
Wenn Sie eine Kamera von Ussing verwenden: Anwendungen von Ricerca
Das Ussing-Kamerasystem ist ein vielseitig einsetzbares Instrument in zahlreichen Bereichen der wissenschaftlichen und pharmazeutischen Forschung:
Studi di Funzione CFTR e ENaC
Misura leitet die Behandlung der ionischen Epithelkanäle ein und führt zur Reisigung der Zistfibrose und der Polmonarpathologie.
Typisches Protokoll: Baseline SCC → Amiloride (ENaC-Block) → Forskolina (CFTR-Aktivierung) → CFTRinh-172 (CFTR-Inhibition)
Verbautes System: EasyMount-System mit P2300-Kammern für einzelne Mobilfunk- oder Lufttests.
Integrität der Barriere über TEER
Bewerten Sie nicht invasiv die Mietverhältnisse und die Funktion der Barrieren in Echtzeit.
Range typeici:
- Caco-2 (Darm): 200-500 Ω·cm²
- MDCK (Renale): 100-200 Ω·cm²
- Epitelio intestinale nativo: 20-150 Ω·cm²
Vorteile von PI: Die Software Acquire & Analyze berechnet den TEER automatisch pro Bereich mit Kompensation des Widerstands der Lösung.
Transport und Durchlässigkeit von Farmaci
Bidirektionaler Zugang zum Kompostierungsweg durch die Epithelbarriere, wesentlich für die Landwirtschaft.
Parametri misurabili:
- Offensichtliche Permeabilität (Papp)
- Rapporti di efflusso (ER)
- Aktiver vs. passiver Transport
Ideale Einrichtung: EasyMount-System mit P2400-Kammern mit geringem Volumen, um die Kosten für Reagenzien zu senken.
Cinetica Dosis-Risposta und Tempo-Risposta
Kontinuierliche Überwachung der pharmakologischen Reaktion mit zeitlich begrenzter Lösung.
Anwendungen:
- Dosis-Risiko-Kurve der Agonisten/Antagonisten
- Studi di desensibilizzazione recttoriale
- Merkmale des Beginns und des Offsets der Farmaci
PI-Kapazität: Das VCC MC8-System mit Acquire & Analyze-Software ermöglicht die kontinuierliche Datenerfassung und automatische Protokollierung für die Reproduktion.
Malattia-Modelle und Screening-Komposte
Bewerten Sie pathologische Tests oder behandelte Tests mit Tossin, Infektionen oder Entzündungsreizen.
Esempi di ricerca:
- Werfen Sie die Batterie auf Ihre Darmbarriere
- Citochin entzündet sein polmonares Epithel
- Screening von kompostierbaren Reinigungsmitteln zum Schutz vor Barrieren
Validiertes Protokoll für den CortoCircuit-Strom (SCC)
Dieses Protokoll garantiert einwandfreie SCC-Reproduktion und höchste Qualität. Gesamttempo: 2-4 Stunden pro Sekunde des Stoffmodells.
Schritt 1: Vorbereitung der Tampons und der elektrischen Geräte (30-60 Min.)
Tamponi:
- Bereiten Sie eine Ringer- oder Krebs-Henseleit-Änderungslösung vor
- Überprüfen Sie die Osmolarität (280-300 mOsm/L) mit dem Osmometriegerät
- Vorvergasung mit 95 % O₂/5 % CO₂ alle 15–20 Minuten
- Stellen Sie sicher, dass die Temperatur bei 37 °C liegt
Hinweis: Verwenden Sie einen Hochqualitätspuffer mit überprüfter Osmolarität, um ein schnelles Ergebnis zu gewährleisten.
Elettrodi:
- Kontrollieren Sie den Offset der Stromversorgung (< 3 mV erreichbar)
- Bereiten Sie Ponti di Agar vor (3 % Agar in 3 M KCl)
- Riempire i ponti ohne großen Aufwand
Pass 2: Montaggio del Tessuto (15-30 Min.)
Für den Einsatz von Mobiltelefonen (EasyMount):
- Rimuovere l'inserto dalla piastra di coltura
- Sciacquare delicatamente con buffer riscaldato
- Positionieren Sie den Einschub auf dem EasyMount-Schieber
- Montieren Sie den Schieber in der Kamera mit korrekt positioniertem O-Ring
- Serrare uniformemente le viti per sigillare senza comprimere eccessivamente
Per tessuti freschi (P2400):
- Der Text wird in der nächsten Phase (mehr als die nächste) gelesen.
- Korrekte Ausrichtung des Gewebes (apikale/basolaterale Lato)
- Positionieren Sie das Gerät mit dem bei Bedarf erforderlichen Stützstift
- Schnell zusammenbauen, um das Risiko zu minimieren
Controllo perdite:
- Riempire entrambi in Lati con buffer
- Überprüfen Sie, ob die Bolle in der Apertura eintrifft
- Warten Sie 2-3 Minuten und kontrollieren Sie den Flüssigkeitsfluss
Schritt 3: Gleichgewicht und Grundlinie (20-40 Minuten)
- Legen Sie die elektrischen Geräte an die Tür der Kamera
- Nutzen Sie die PI-Software zum Erfassen und Analysieren
- Stellen Sie die Spannungsklemme auf 0 mV ein
- Kontinuierliche Vergasung (95 % O₂/5 % CO₂)
- SCC bis zur Stabilisierung überwachen (< 5 % Abweichung in 10 Min.)
- Registrieren Sie den Basis-SCC alle 5–10 Minuten
Criteri di qualità baseline:
- TEER > Wert soglia specifà del tessuto
- Drift SCC < 2 μA/h
- Rumore < 1 μA Spitze-Spitze
Schritt 4: Sequenza Farmacologica (60-120 Min.)
Protokollstandard für Studio-Kanal-Ionen-Epithelien:
| Tempo | Intervento | Konzentration | Risposta Attesa |
|---|---|---|---|
| 0-20 Minuten | Ausgangswert | - | SCC stabil |
| 20-35 Minuten | Amilorid (apicale) | 10 μM | ↓ SCC (Block ENaC) |
| 35-60 Minuten | Forskolina (bilaterale) | 10 μM | ↑ SCC (Aktivierung CFTR) |
| 60-75 Minuten | CFTRinh-172 (apikal) | 10 μM | ↓ SCC (Inibizin CFTR) |
| 75-90 Minuten | Ouabaina (basolaterale) | 100 μM | ↓ SCC (Block Na⁺/K⁺-ATPasi) |
Best Practice beim Hinzufügen von Kompost:
- Bereiten Sie Lösungsvorräte in DMSO vor (< 0,1 % endgültig)
- Vorbereiten und bei 37°C kompostieren
- Länger verlängern, um Temperaturgefälle zu vermeiden
- Mescolare delicatamente dopo the aggiunta (Pipettieren oder mit Gas füllen)
- Warten Sie bis zum nächsten Schritt, bevor Sie eingreifen
Schritt 5: Pulsierender TEER während des SCC (optional)
Das VCC MC8-System von Physiologic Instruments ermöglicht die automatische Messung von TEER ohne Unterbrechung der SCC-Spannungsklemme:
- Impulsparameter einstellen: ΔV = 1-5 mV, Dauer 1 s
- Impulsfrequenz: ogni 60 s (regelbar)
- Die Software berechnet automatisch: R = ΔV / ΔI
- TEER normalisiert: R × Fläche (Ω·cm²)
Dadurch kann die Barriereintegrität parallel zum ionischen Transport überwacht werden.
Schritt 6: Qualitäts- und Sportdatenkontrolle
Verifiche finali:
- Bestätigen Sie die Bestätigung der Farmaci mit Briefen
- Überprüfen Sie nach dem Experiment, ob die Ursache eine Anomalie aufweist
- Kontrollieren Sie den TEER-Wert (nicht mehr abgebaut > 30 %).
- Documentare osmolarità final tamponi
Esportazione e analisi:
- Speichern Sie große Daten (.csv oder .xlsx) aus der Acquire & Analyze-Software
- Berechnen Sie ΔIsc für den geplanten Eingriff: Δ = (Plateau nach der Landwirtschaft) – (Basislinie vor der Landwirtschaft)
- Normalisierung pro Fläche: Dichtestrom (μA/cm²)
- Statistische Analyse: ANOVA, T-Test-Apparat mit multifunktionaler Korrektur
💡 Vorschlag:
Die Software „Acquire & Analyze“ von Physiologic Instruments kann zur Standardisierung der Datenerfassung und Verbesserung der Reproduzierbarkeit bei Experimenten und Bedienern verwendet werden.
Flusso di Lavoro Rapido per Misurazioni TEER
Die Messung des TEER (Trans-Epithelial Electrical Resistance) ermöglicht eine schnelle Bewertung und beeinträchtigt nicht die Integrität der Epithelbarriere. Gesamttempo: 5-15 Minuten.
Standardmethode: Anwendung von Spannungsimpulsen
Einrichtung (2 Min.):
- Das in der SCC-Protokollsitzung beschriebene Text-/Einfügungsexemplar wird erstellt
- Alle 5-10 Minuten bei 37°C ausbalancieren
- Überprüfen Sie, ob die Bolle in der Apertura eintrifft
Misurazione (1 min):
- Anwendung von kleinen Spannungsimpulsen (ΔV = 1-5 mV, Dauer 1 s)
- Registrieren Sie die resultierende Leistungsabweichung (ΔI)
- Software PI berechnet automatisch: R = ΔV / ΔI (Ω)
- Normalisierung pro Fläche: TEER = R × Fläche (Ω·cm²)
Compensazione Resistenza Soluzione:
Um genau zu sein, müssen Sie die Widerstandsfähigkeit der Lösung (nicht auf den ersten Blick) berücksichtigen:
TEER- Korrektur = ( GesamtR - Lösung R) × Fläche
Monitoraggio nel Tempo:
Per studi longitudinali (es. formazione giunzioni strette, effetti farmaci su barriera):
- Misurare TEER in regelmäßigen Abständen (also nur 24 Stunden)
- Trägt TEER im Vergleich zum Tempo der Reifungs-/Degradationskinetik
- Nutzen Sie die automatische Trending-Funktion der PI-Software
Wert TEER des Riferiments (Ω·cm²):
- Caco-2 (Darm): 200-500 Tage nach 21 Tagen
- MDCK (Renale): 100-200 Tage 3-5 Tage
- HUVEC (endoteliale): 20–40 Tage, 3–5 Tage
- BHS-Kokultur: > 150 pro Barrierestretta
- Epitelio intestinale ratto: 20-80 (variabel je nach Region)
- Epitelio polmonare: 500-2000 (alveolen altamente stretti)
Vantaggio del VCC MC8:
Das VCC MC8-System von Physiologic Instruments wurde für TEER-Messungen während Experimenten mit Spannungsklemmen entwickelt und ermöglicht die parallele Überwachung der Barriereintegrität mit Ionen-Messungen.
Kontrollliste für die Datenqualität
Folgen Sie dieser Checkliste zunächst, während und nach einem weiteren Experiment, um robuste und reproduzierbare Daten zu garantieren:
✓ Vorversuch
- Die Stromversorgung erfolgt mit einem Offset < 3 mV
- Ponti di Agar Preparati di Fresko, ohne Bolle
- Verifizierte Osmolaritätstests (± 5 mOsm/L apikal und basolateral)
- Tampons zur Entgasung und Vorvergasung mit 95 % O₂/5 % CO₂
- Stabilisierte Temperatur bei 37 ± 0,5°C
- Funktionierendes Gas- und Umluftsystem
- Tessuto/Inserto vorbereiten, zweites Protokoll standardisieren
- Controllo perdite completato (no gocce, livelli stabili)
✓ Während des Experiments
- Baseline SCC stabil (< 5 % Abweichung in 10 Min.)
- TEER beginnt mit der Auswahl des Papiertyps
- Nessuna bolla attraversa l'apertura del tessuto
- Elektrischer Strom < 1 μA Spitze-zu-Spitze
- Konstante Wintertemperatur (± 0,5°C)
- Die Vergasung läuft ohne Unterbrechung weiter
- Fügen Sie ein zweites Timing-Protokoll hinzu
- Ogni intervento farmacologico Raggiunge-Plateau
✓ Post-Esperimento
- Risposte farmacologiche coerenti con letteratura
- Corrente sensibile agli inibitori > 50 % Ausgangswert (pro Quellweg)
- TEER-Finale nicht degradiert > 30 % zu Beginn gelöst
- Es werden Anomalien aus der Kompostierung festgestellt
- Die Daten werden mit vollständigen Metadaten gespeichert
- Calcoli di normalizzazione verificati (Bereich, Resistenza-Lösung)
- Setup-Fotodokumentation (zur Fehlerbehebung)
⚠️ Rote Flaggen der Qualität:
Wenn ich diese Frage verifiziere, sind die Daten nicht unbedingt eidesstattlich:
- Baseline-SCC-Varia > 20 % während des Gleichgewichts
- TEER < 50 % des Werts muss vor dem Start erreicht werden
- Nessuna hat eine Farmaci mit angegebener Wirksamkeit erhalten
- Kontinuitätsableitung (> 5 μA/h)
- Rumore ad alta frequenza improvviso (problema elettrico)
- Bolle visibili nell'apertura o perdite evidenceti
Matrice di Risoluzione Problemi
Diese Diagnosetabelle ermöglicht eine schnelle Identifizierung der Ursache und Lösung für Probleme, die in der Gemeinschaft nicht mit der Kamera von Ussing durchgeführt wurden:
| Sintomo | Ursache Wahrscheinlichkeit | Soluzione | Prävention |
|---|---|---|---|
|
Basislinie instabil / Ableitung SCC ist variabel und nicht stabil |
• Offset elettrodi elevato • Bolle nei ponti o nell'apertura • Temperatur nicht stabil • Intermittierende Vergasung • Perdita nella camera |
• Nehmen Sie elektrische Geräte zur Hand • Riempire ponti eliminando bolle • Attendere stabilizzazione termica • Überprüfen Sie den Fluss des Gases • Kamera montieren und zusammenbauen |
• Testen Sie die elektrischen Geräte vor dem Experiment • Entgasen Sie die Tamponi sotto vuoto • Blocchi 30 Min. vorkochen • Kontrollieren Sie das Gas • Der neue O-Ring wird einheitlich verwendet |
|
Rumore elevato / Basso SNR Segnale irregolare, schwierig, vedere risposte |
• Probleme mit der Erdung • Elektrische Interferenz 50/60 Hz • Connessioni elettrodi allentate • Cavi danneggiati • Elettrodi sporchi/ossidati |
• Überprüfen Sie die Verbindung zum Verstärker • Allontanare da Fonti elettriche • Serrare connettori elettrodi • Ispezionare/sostituire cavi • Elektrolyse mit gesättigter KCl-Lösung |
• Es ist notwendig, Faradays Gabbia zu verwenden • Richten Sie Ihren Antivibrationsschalter ein • Manutenzione regolare elettrodi • Cavi Schermati di qualità • Integriertes PI-System zur Filterung |
|
TEER troppo basso Resistenza inferiore alle aspettative |
• Tessuto/monostrato danneggiato • Giunzioni strette non formate • Perdita (bypass corrente) • Inserto montato male • Coltura non matura |
• Bereiten Sie den Vorgang vor und verwenden Sie den neuen Teig • Attendere maturazione coltura (Caco-2: 21d) • Siegel kontrollieren, wieder zusammenbauen • Überprüfen Sie die Montagetechnik • Kontrollieren Sie die Coltura-Bedingungen |
• Manipolare Gewebe sind zart • Validieren Sie TEER vor dem Experiment • Training su tecnica montaggio • Strenge SOPs für die Zellkultur • EasyMount PI entfernt danno montaggio |
|
Nessuna risposta a inibitori Farmaci non producono cambio SCC atteso |
• Reagenz scaduto/degradato • Concentrazione errata • Ordine di applicazione errato • Lato camera sbagliato (apicale vs basolaterale) • Pathway ionico nicht aktiv in seinem Werk |
• Bereiten Sie das Stockfresko da polvere vor • Ricontrollare calcoli diluizione • Seguire Standard-Sequenzprotokoll • Überprüfen Sie die Ausrichtung des Textes • Konsultieren Sie die Literatur für Ihr Modell |
• Brühe aliquotieren, bei -80°C einfrieren • SOP für die Kompostierung • Checkliste sequenza farmaci • Marcare lati camera (A/B) • Positive Kontrolle in jeder Sitzung |
|
Corrente negativa anomala SCC in der entgegengesetzten Richtung |
• Elettrodi invertiti • Tessuto montato al contrario • Invertierter Polaritätsverstärker • Nicht standardmäßiger ionischer Transport |
• Steuern Sie das elektrische Kabel • Überprüfen Sie die Ausrichtung des Textes • Controllare-Einstellungssoftware • Validare con controllo noto |
• Etichettare chiaramente apicale/basolaterale • Codice colore cavi elettrodi • Vorkonfigurierte Vorlagensoftware • Passo-passo visuelle Protokolle |
|
Deriva dopo aggiunta compositeo Corrente non raggiunge-Plateau, abgeleitete Kontinuität |
• Effetto temperatura (composto freddo) • Osmotischer Gradient • Lösungsmittel (DMSO) im Ecccesso • Danno tessuto da composto • Miscelazione inadeguata |
• Die Lösung vor dem Erhitzen auf 37°C bringen • Überprüfen Sie die Osmolarität nach der Zugabe • Ridurre-Konzentration DMSO < 0,1 % • Geben Sie die Mischung in den Topf • Mescolare delicatamente dopo aggiunta |
• SOPs gestione composite • Überprüfen Sie die Osmolarität aller Lösungen • Begrenzte DMSO-Protokolle • Testen Sie den vorläufigen Test • Tecnica standardizzata aggiunta |
|
Variabilità tra repliche CV% hoch durch Kameras/Experimente |
• Nicht standardisierte Papiervorbereitung • Età/passaggio cellule variabile • Operatori differenti • Timing non sincronizzato • Nicht kalibriertes Gerät |
• Sviluppare SOPs klären • Zellpassage kontrollieren (P20-30) • Intensive Schulung der Bediener • Protocolli automatizzati • Reguläre Instrumente kalibrieren |
• SOPs mit Foto geschrieben • Banche zelluläre caratterizzate • Certificazione operatori • Software PI mit Automatisierung • Manutenzione Preventiva Schedulata |
💡 Supporto Physiologische Instrumente:
Zur technischen Unterstützung und Information über Ihr System kontaktieren Sie Physiologic Instruments über die Website: physiologicinstruments.com/pages/contact
Selettore Prodotti Physiologische Instrumente
Stellen Sie das System mit der Kamera von Ussing zusammen, um Ihre Arbeit zu erledigen und Qualitätsdaten zu erhalten. Diese Anleitung hilft Ihnen dabei, die optimale Konfiguration anhand Ihres experimentellen Modells zu ermitteln:
| Applicazione / Tipo Tessuto | Sistema Consigliato | Vantaggi Chiave | Link |
|---|---|---|---|
|
Monostrati cellulari (Caco-2, MDCK, T84, vorrangige Farben) |
EM-CSYS-8 8-Kanal EasyMount-System Enthalten: • 8 Kameras P2300 • 8-teiliges Set Elettrodi P2020 • 8-adrige Leitungssätze P2024-40 • Standkondensator-Heizblock |
• Kompatibilität mit universellen Einsätzen (Snapwell, Transwell, Millicell, Nunc) • Schneller Montag mit Systemschieber • Durchsatz hoch (8 Experimente gleichzeitig) • Nutzbares Volumen: 2,0–8,0 ml • EasyMount-Brevetto-Design |
Scopri EasyMount |
|
Tessuti animali volume Ridotto (intestino ratto, tessuti con reagenti costosi) |
EM-LVSYS-8 8-Kanal-Low-Volume-System Enthalten: • 8 Kameras P2400 • 8-teiliges Set elektronischer Geräte • Valvole aria P2060 • Stand sistema completo |
• Volumen ridotto 1,0-5,0 ml • Risparmio reagenti costosi • Öffnungsfläche max. 0,71 cm² • Ideale per studi FLUX • USA Slider-Serie P24xx |
Scopri Low-Volume |
|
Tessuti intestinali ratto/coniglio (intestino, colon, tessuti nativi) |
EM-RSYS-8 8-Kanal-Rattengewebesystem Enthalten: • 8 Kameras P2250 • Schieber P2252 (Fläche 1,00 cm²) • Set elettrodi completi • Hardware-Montage-Tessuto |
• Specifico per intestino ratto, cavia, coniglio • Widmungsfläche des Schiebers 1,00 cm² • Setup ottimizzato tessuti freschi • Schnellmontagesystem EasyMount • Validato per ricerca GI |
Scopri Rattengewebe |
|
Systeme mit 4 oder 6 Kanälen (Laboratori Piccoli, Budgetlimit) |
EM-CSYS-4 / EM-CSYS-6 Skalierbare Konfigurationen: • 2-Kanal: EM-CSYS-2 • 4-Kanal: EM-CSYS-4 • 6-Kanal: EM-CSYS-6 |
• Prezzo accessibile • Hochwertiges 8-Kanal-System • Espendibile in futuro • Ideale per Startup Labs • Alle Vorteile von EasyMount |
Vedi Opzioni |
|
Komplettes System mit Datenerfassung (setup chiavi in mano) |
P2300 EasyMount Komplettsystem Enthalten: • Camere e stand • VCC MC8-8S Spannungs-/Stromzange • Software erwerben und analysieren • DI-720P Datenerfassung • DM-MC6 Eingangsmodule |
• Vollständige integrierte Lösung • Softwarebeschaffung & -analyse inkl. • Datenerfassung in Echtzeit • Automatische TEER/SCC-Analyse • Pronto all'uso |
Sistema Completo |
Haben Sie Probleme mit der Konfiguration?
Besuchen Sie die Website von Physiologic Instruments für weitere Informationen über Ihr verfügbares System:
- 📧 E-Mail: Kontaktieren Sie uns per E-Mail an physiologicinstruments.com/pages/contact
- 🌐 Sito-Webseite: physiologicinstruments.com
- 📋 Produktinformationen: Ussing Chamber Systems Collection
Accessori e Componenti
Alle PI-Systeme enthalten oder können konfiguriert werden mit:
- Ag/AgCl-Elektroden: Stellen Sie P2020 und P2020-S für genaue Messungen ein
- Slider EasyMount: Serie P23xx für P2300 Kammern, Serie P24xx für P2400 Low-Volume, Serie P2252 für Tessuti Ratto
- Elektrodenleitungssätze: P2024-40 (40 Zoll) je nach Verfügbarkeit
- Ventilbereich: P2060 Dual-Luftregelventile zur Steuerung der Gaszufuhr
- Kammerkappen und Schläuche: Kappen inklusive, Schlauchsets TK-7
- Gaswaschflaschen: GWB1 pro Umidifizierungsgas
- Füllnadeln: FN15 pro Person
Ich habe Physiologic Instruments für das Kamerasystem von Ussing entwickelt
Physiologic Instruments entwickelt und produziert Instrumente zum Transport von Epithelien, insbesondere mit Fokus auf das Kamerasystem von Ussing EasyMount.
🔬 Design EasyMount Brevettato
- Das schnelle Montagesystem verringert die Einrichtungsgeschwindigkeit erheblich
- Universelle Kompatibilität mit kommerziellen Einsätzen (Snapwell, Transwell, Millicell, Nunc)
- Das Zimmer sollte während der Montage nicht vom Wärmeblock entfernt werden
- Interkombinierbarer Schieber für verschiedene Stoff-Tipps
🏭 Produkt aus den USA
- Planung und Produktion in den Vereinigten Staaten
- Mehr als 40 Jahre Erfahrung in der Strukturierung der Physiologie
- Das Produkt ist aus hochwertigem Acryl gefertigt
- Elektronische Komponenten werden auf ihre Zuverlässigkeit hin geprüft
🔧 Sistemi Integrati Completi
- Spannungs-/Stromklemmen VCC MC6 und MC8 mit optiGain
- Software zum Erfassen und Analysieren von Daten zur automatischen Datenerfassung
- Direkte Kompatibilität mit Kamera, Klemme und Software
- Skalierbare Konfiguration von 2 bis 8+ Kanälen
🌍 Riconoscimento Internazionale
- Nutzung der Universität und des gesamten Landes
- Referenzen in vielen wissenschaftlichen Publikationen
- Validierungssysteme für die Behandlung von Fibrosy cistica, Elettrofisiologia, Farmacologia
- Globaler Vertrieb, der sich gegen Rivenditori richtet
📚 Vielseitige Anwendungsmöglichkeiten
- Studieren Sie den ionischen Transport, die Barrierefunktion und die Durchlässigkeit der Landwirtschaft
- Kompatibel mit Zellular- und Tier-/Umanie-Farben
- TEER-Fehler und CortoCircuit-Fehler (SCC)
- Anwendungen bei Magen-Darm-Erkrankungen, Magen-Darm-Erkrankungen, Niere und Haut
🔄 Modularität und Flexibilität
- Das EasyMount-System kann seriell angeschlossen werden, um mehrere Kameras zu erweitern
- Verfügbare Schieberegler für verschiedene Geometrien und Abmessungen des Materials
- Möglichkeit, die Kammern P2300, P2400 und P2250 in einem einfachen Aufbau zu kombinieren
- Upgrade-Möglichkeiten in Sekundenschnelle, wenn ein Labor benötigt wird
Häufig gestellte Fragen (FAQ)
Welche Öffnung hat die Kamera, die Sie benötigen?
Antwort: Die Auswahl der Hauptaufgabe liegt bei:
- Stoffart: Monostrati zelluläre Einfügung → 0,1–0,6 cm² (Einfügung Standard 12 mm). Tessuti nativi spessi → 0,7-3,14 cm².
- Stromstärke: Da der Strom sehr hoch ist (> 200 μA), ist die Öffnung größer als die Stromverteilung. Wenn der Strom niedrig ist (< 10 μA), öffnet sich eine kleine, erhöhte Stromdichte.
Praktische Regel: Für Caco-2, MDCK und den größeren Teil der Mobilfunklinie, 12 mm (0,6 cm²) Durchmesser idealerweise einführen. Pro Darm/Ratte, 0,71–1,13 cm². Pro Darm beträgt das Fell 1,13–3,14 cm².
Wie konnte die Ableitung des Segnales während der ersten Experimente vermieden werden?
Antwort: Die Ursache liegt in der thermischen Instabilität, der Elektrizität, der Polarität oder der Änderung der Osmotik. Zur Minimierung:
- Stabilisieren Sie die Temperatur vor dem Experiment 30 Minuten lang
- Verwenden Sie Ag/AgCl-Elektroden mit niedrigem Offset (< 3 mV) und wechseln Sie die Regulierung
- Stellen Sie den Stoff alle 20–30 Minuten ins Gleichgewicht, bevor Sie die Grundlinie registrieren
- Evitare bolle nell'apertura (gassificare delicatamente)
- Stellen Sie sicher, dass die apikale/basolaterale obere Osmolalität übereinstimmt (± 5 mOsm/L)
- Um die Verdunstung zu verhindern, wird eine umfeuchte Gaszufuhr verwendet
Die PI-Software umfasst Driftkorrekturalgorithmen, die bei Bedarf eine Korrektur der linearen Nachbearbeitung ermöglichen.
Ist es möglich, dass SCC und TEER bei der Vorbereitung verwendet werden?
Antwort: Ja, absolut! Anzi, ich bin zurückgekommen. Die Verstärker VCC MC8 von Physiologic Instruments verfügen über:
- Stellen Sie die Dauerspannungsklemme gemäß SCC ein
- Es werden automatisch kurze Spannungsimpulse (1-5 mV, 1 s) pro TEER angewendet, ohne dass der SCC unterbrochen wird
- Berechnen Sie TEER im aktuellen Tempo
Dies sind zusätzliche Informationen: Der SCC ist mit dem ionischen Transport beschäftigt, während TEER die Integrität der Straße überwacht. Eine TEER-Kälteprobe während des Experiments kann anzeigen, dass dann kein Stoff vorhanden ist oder die parazelluläre Permeabilität erhöht wird.
Timing festgelegt: TEER-Impulse nur 60 Sekunden, ohne SCC-Feedback.
Quanto Spesso devo sostituire gli elettrodi Ag/AgCl?
Antwort: Die Dauer der Stromversorgung hängt von der Betriebsfrequenz und der Bedienung ab:
- Täglicher Einsatz: Bei 3-6 Monaten oder bei einem Offset > 5 mV
- Moderato verwenden (2-3 Volt/Minute): 6-12 Monate beginnen
- Gelegentlich: Jedes Jahr kommt es zu einem Leistungsabfall
Manutenzione per prolungare vita:
- In gesättigter KCl-Lösung aufbewahren (nicht in destilliertem Wasser!)
- Machen Sie sich mit dem Wasser vertraut, das Sie nur brauchen
- Stellen Sie sicher, dass der Offset nicht verwendet wird
- Re-Clorurare elettrodi se strato agCl si consuma (Möglichkeit, eine Richiede-Setup elettrochimico)
Physiologic Instruments verfügt über Ag/AgCl-Elektroden (Modelle P2020 und P2020-S) für das EasyMount-System.
Ist das EasyMount-System mit meinen eigenen Steckverbindungen kompatibel?
Antwort: Ja! Das EasyMount-System von Physiologic Instruments ist auf universelle Kompatibilität mit allen wichtigen kommerziellen Produkten ausgelegt:
- Corning Snapwell (12 mm, 24 mm)
- Corning Transwell (6,5 mm, 12 mm, 24 mm)
- Millipore Millicell
- Falcon Zellkultureinsätze
- Sarstedt TC Insert
Zu den weiteren Systemen gehören interkombinierbare Schieberegler zur Anpassung an verschiedene Formate. Wenn Sie personalisierte oder persönliche Daten in Ihre Gemeinschaft einfügen, wenden Sie sich an unser technisches Team – wir können den Slider individuell auf Ihrer Website herstellen.
Hinweis: Das traditionelle System P2400 wurde ursprünglich für die Installation direkt auf dem Computer, nicht per Eingabe, entwickelt.
Können Sie das System nutzen, um die Durchlässigkeit von Nanopartikeln oder großen Molekülen zu gewährleisten?
Antwort: Ja, das Ussing-Kamerasystem kann zum Studium der Durchlässigkeit eines Kompostierungsspektrums verwendet werden, einschließlich:
- Kleine Moleküle (Farmaci, Tossine)
- Peptide und Proteine
- Nanopartikel (< 200 nm funziona bene)
- Liposom und Mizellen
Methode:
- Füllen Sie die markierte Kompostierung (fluoreszierend, radioaktiv) an den Spender
- Campionare lato ricevente in periodli li temporali
- Quantifizierung mit geeigneter Analysemethode
- Berechnen Sie den scheinbaren Permeabilitätskoeffizienten (Papp)
Die PI-Software kann Pappe automatisch berechnen, wenn Konzentration und Lautstärke eingegeben werden. Für Nanopartikel wurde das EM-CSYS-8-System mit einem automatischen Campion-Kit ausgestattet, um die Variabilität des Bedieners zu minimieren.
Beschränkung: Partikel > 500 nm können zu Sedimenten führen und es können keine zuverlässigen Ergebnisse erzielt werden. In diesem Fall sollten Sie dinamische Systeme (Durchfluss) in Betracht ziehen.
Wie hoch sind die Betriebskosten und die Kosten?
Antwort: Die Kosten für den Betrieb einer Kamera von Ussing liegen in der Nutzungsfrequenz und in der spezifischen Anwendung. Zu meinen wichtigsten Kosten zählen:
Consumabili principali:
- Ag/AgCl-Elektroden (periodische Verbindung)
- Agar per ponti elettrodi
- Spezifische Reagenzien für die Reisverarbeitung
- Puffer-/Salzlösung
- Fügen Sie Mobiltelefone ein, wenn Sie Farben verwenden (Snapwell, Transwell usw.)
- Komponenten aus Kunststoff (O-Ringe, Schläuche)
Ich habe erhebliche Unterschiede im Grundvolumen und in der Art der Experimente festgestellt. Aus persönlichen Gründen konsultieren Sie bitte die Einzelheiten Ihrer Reise.
Offrite-Training für neue Benutzer?
Antwort: Für Ihre Schulungsinformationen und verfügbaren Support kontaktieren Sie Physiologic Instruments über die Website.
Die Website enthält Risiken und Informationen zu Ihren Produkten, die Sie bei der Nutzung Ihres Systems unterstützen können.
Kontaktieren Sie Physiologic Instruments für spezifische Informationen: physiologicinstruments.com/pages/contact
Kann das System bei Raumtemperatur (4°C) oder im Inkubator (5% CO₂) verwendet werden?
Antwort: Von der Konfiguration abweichen:
Kamera fredda (4°C): Sì, con cautele. Die elektronischen Verstärker stellen die Umgebungstemperatur ein, bis die Kamera eingeschaltet ist und Freddo eingeschaltet ist. Verwenden Sie Spannungskäfige für die Stromversorgung. Achtung: Bei 4°C wird die Temperatur deutlich erhöht, bis die SCC etwas tiefer ist.
CO₂-Inkubator: Nicht für das vollständige System geeignet. Die Verstärker sind nicht auf eine Umgebungstemperatur von 37 °C/95 % ausgelegt und die Elektronik kann eingeschaltet werden. Hinweis:
- Es wird eine 95 %ige O₂/5 % CO₂-Gasvergasung verwendet, die in der Kamera sprudelt
- Erhitzen Sie es mit Blöcken bei 37°C Wasserzirkulation, ohne es im Inkubator zu lassen
- Dies ist ein Standard-Setup und eine perfekte Funktion, um den pH-Wert mit Bicarbonat-Puffer zu erhalten
Richten Sie den PI-Standard ein: Stellen Sie Ihre Bank mit eingeschalteter Gaszufuhr + Wärmezufuhr zur Umwälzung = optimale Umgebungstemperatur ein, ohne dass ein Inkubator erforderlich ist.
Fazit: Porta la Tua Ricerca al Livello Successivo
Das Ussing-Kamerasystem ist präziser und zuverlässiger, um den ionischen Transport und die Funktion der Epithelbarriere zu studieren. Mit dem System der neuen Generation von Physiologic Instruments:
✓ Dati di Qualità Superiore
- Risoluzione sub-microampere
- Stabilità a lungo termine
- TEER e SCC simultanei
✓ Efficienza Migliorata
- 70 % höhere Geschwindigkeit einrichten (EasyMount)
- 8-32 campioni in parallelo
- Protocolli automatizzati
✓ Vollständiger Support
- Schulung inklusive
- lebenslanger technischer Support
- Protocolli validati
Pronto per Iniziare?
Das für Sie perfekte System von Physiologic Instruments ist:
Physiologische Instrumente
Für Kontakt- und Supportinformationen besuchen Sie bitte:
physiologicinstruments.com/pages/contact
Empfohlene Ausrüstung für diese Forschung
| Ausrüstungskategorie | Beschreibung | Link |
|---|---|---|
| Ussing Chamber Systems | Komplette elektrophysiologische Plattformen für Studien zum epithelialen Transport und zur Barrierefunktion. | Ussing Chamber Systems |
| Verwendung von Kammern (EasyMount & Classic) | Separate Kammern für Darm, Atemwege, Nieren und kundenspezifisches Gewebe. | Ussing Chambers |
| Verwendung von Kammerschiebern | Präzisions-Acryl-Schieber zur Montage von Gewebeproben und zur Nachbildung experimenteller Geometrien. | Verwendung von Kammerschiebern |
| Spannungs-/Stromzangen (VCC MC8-Serie) | Spannungsklemmverstärker für CFTR-Assays, TEER und transepitheliale Messungen. | Spannungsklemmen |
| Software erwerben und analysieren | Software zur Datenerfassung und -analyse für elektrophysiologische Experimente an Epithelzellen. | Erfassen und Analysieren |